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免疫組織的五種化學(xué)染色法

更新時(shí)間:2012-08-08點(diǎn)擊次數(shù):197

1、直接

2、間接法

3、未標(biāo)記抗體法

   抗體和酶、熒光素結(jié)合后,或多或少的降低了抗體與抗原的結(jié)合能力。有酶橋法和PAP法,但前者弊端較多。PAP法(PeroxidaseAntiperoxidase.PAP)PAP復(fù)合物(二分子抗體,三分子酶),體積小,穩(wěn)定,穿透性好特點(diǎn):較間接法敏感20~100倍,較前幾種方法非特異性染色輕。

4、ABC法(Avidin-Biotin-ComplexMethod)

   Avidin——卵白素,有四個(gè)亞單位,每個(gè)亞單位有138個(gè)氨基酸,分子兩68kD。一個(gè)卵白素分子能與4個(gè)分子的生物素結(jié)合,基本上不可逆,比抗原抗體結(jié)合力大1000000倍,只有在pH1.5的條件下才能將其分離。Biotin——生物素,一分子的抗體可結(jié)合150個(gè)生物素分子,和多種酶結(jié)合后,不影響催化活性。

5、LAB法(LabeledAvidin-Biotin)

   特點(diǎn):1、敏感性較PAP法提高20~40倍;2、非特異性染色幾乎沒有;3、可用于IHC,核酸雜交等。



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