2012-1024
一、康寧Corning1、標(biāo)準(zhǔn)TC處理：培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿為大氣下等離子體處理，滾瓶和培養(yǎng)管為真空等離子體處理，處理的表面帶負(fù)電，增加氧原子含量。2、CellBIND處理：是指微波等離子處理，處理效果更好，更親水。二、BD1、BDFalcon處理：為真空等離子處理。2、BDPrimaria處理：為真空等離子體加入氧氣和氨氣混合氣體處理，使表面有含氧和含氮基團(tuán)。三、Nunc：表面處理專家1、PolySorp：對疏水性分子具有高親和力。2、MediSorp：化學(xué)性介于Poly...
查看更多2012-1022
一、細(xì)胞系（CellLine）原代培養(yǎng)舞經(jīng)傳代成功即成細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系（LineageofCells）所組成。二、細(xì)胞株（CellStrain）通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物稱為細(xì)胞株。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱為有限細(xì)胞株（finitecellstrain）;如果可以連續(xù)傳代,稱為連續(xù)細(xì)胞株（continuouscellstrain）。對于人類腫瘤細(xì)胞,在...
查看更多2012-1018
1、擴(kuò)增：不同的干細(xì)胞，其擴(kuò)增方法不同。如造血干細(xì)胞為懸浮培養(yǎng)，而腫瘤干細(xì)胞則為貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞。2、消化：根據(jù)細(xì)胞耐受性的不同，有多種方法，如機(jī)械法，化學(xué)法，以及膠原酶、胰酶消化等不同方法。3、凍存：取處于對數(shù)期的干細(xì)胞,消化,并吹打為單細(xì)胞懸液,用2X培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，將等體積DMSO逐滴加入細(xì)胞懸液中，輕輕吹打混勻，重懸細(xì)胞于凍存管中，并置于凍存盒中，凍存盒放入-80℃冰箱。4、分化：鑒定干細(xì)胞的一項重要指標(biāo)就是它的分化能力。一般分化采取加入細(xì)胞因子誘導(dǎo)、共培養(yǎng)、小分子刺...
查看更多2012-1016
一、培養(yǎng)用液1、未滅菌的試劑：高壓或過濾除菌。2、物品儲放區(qū)不潔：經(jīng)常清潔并作滅菌處理。3、消毒過程不標(biāo)準(zhǔn)：檢查高壓滅菌器是否工作正常；過濾后檢查濾膜是否破裂；滅菌后的液體仍需做無菌試驗。4、一次性無菌用品不合格：進(jìn)行質(zhì)量檢測或更換供應(yīng)商。二、取材1、原代組織來源有污染，不要把動物帶入培養(yǎng)室處理；2、可能有污染的組織應(yīng)在酒精中浸泡30s－1min，在清洗用的PBS中加入抗生素。三、玻璃器皿1、儲存時灰塵或細(xì)菌孢子進(jìn)入－一消毒后的器皿應(yīng)嚴(yán)密包裹，置于無菌物品放置區(qū)；未包裹物品放...
查看更多2012-1015
一、凍存運(yùn)輸使用干冰置于塑料泡沫盒中，處理得當(dāng)，可以保存3天。一旦出現(xiàn)融解，細(xì)胞活力將急劇下降。將細(xì)胞凍存管嚴(yán)密包裹，所用塑料泡沫盒應(yīng)該不小于300×300×300mm，壁的厚度約為50mm，內(nèi)部空間為200×200×200mm，這樣大的空間需放入5kg干冰。以zui快的速度將細(xì)胞從液氮轉(zhuǎn)入干冰中，否則細(xì)胞將以10～20℃／min的速度升溫。不能讓溫度高于－50℃。到達(dá)目的地后，即可按常規(guī)復(fù)蘇處理。二、活細(xì)胞運(yùn)輸細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期早期或中期，狀態(tài)良好。如果細(xì)胞密度過大，培...
查看更多2012-1013
一、按劑型分類1、液體試劑①R1和R2分開保存,延長穩(wěn)定性；瓶間差小，沒有復(fù)溶時水質(zhì)引起的差異，使用方便；②可較*排除樣品空白和內(nèi)外源干擾物。2、干粉試劑將各組份溶于液體中分裝再凍干，或用球磨粉碎、或混合后打成片劑，用前再加入量的緩沖液使其溶解（稱復(fù)溶）。二、按試劑組成分類1、單試劑①優(yōu)點(diǎn)：操作簡便適用于各類生化分析，節(jié)約試劑位。②缺點(diǎn)：配方復(fù)雜（穩(wěn)定劑），穩(wěn)定性，不能*避免內(nèi)外源物質(zhì)干擾。2、雙試劑①優(yōu)點(diǎn)：可較*排除樣品空白和內(nèi)外源干擾物，試劑穩(wěn)定，便于儲存，運(yùn)輸和使用，可...
查看更多2012-1012
一、背景細(xì)胞存儲于-170°以下的液氮罐中，在細(xì)胞復(fù)蘇時需要快速地將細(xì)胞凍存管放入37°水浴鍋中快速升溫至37°避免對細(xì)胞造成損傷。在復(fù)蘇過程中凍存管需要用手拿著在搖晃，一個人同時只能拿2-4管，當(dāng)復(fù)蘇較多的細(xì)胞時一個人就無法操作，這給復(fù)蘇細(xì)胞帶來了極大的不便。二、方法改進(jìn)采用一個裝15ml離心管的泡沫板制作一個凍存管托盤，其托盤為：將其底部穿通，孔夠凍存管的大小相當(dāng)，使凍存管放入恰好卡?。辉谕斜P中間插一個桿作為手柄。在復(fù)蘇時將凍存管放在泡沫板托盤上，手拿著托盤手柄，將載有凍...
查看更多2012-1010
一、凍存細(xì)胞解凍步驟1、將細(xì)胞凍存管從加有液氮的保溫桶中用鑷子夾牢，快速在37度水浴鍋中擺動，使凍存液迅速解凍融化。注意在這過程中盡量使凍存管蓋位于水面上。2、待凍存管中大部分內(nèi)容物已呈液態(tài)時，將凍存管表面消毒后移入生物安全柜。二、注意事項1、在細(xì)胞復(fù)蘇操作時，應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快，可不時搖動凍存管，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高，生長及形態(tài)良好。2、從液氮罐中取出凍存管，有時因凍存管未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因凍存管內(nèi)液氮迅...
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