2012-813
有些液體雙試劑,其實(shí)質(zhì)并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩(wěn)定性問題。下面具體講解幾個(gè)例子:1、如ALT試劑盒中,NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩(wěn)定,在pH8.7時(shí)才能穩(wěn)定保存。因此,為了保證試劑穩(wěn)定性,液體雙試劑的R1需要維持pH8.7,但此時(shí)LDH活性大大下降,就失去消除內(nèi)源性丙酮酸的功能,只有加入試劑R2后,反應(yīng)混合液的pH下降至LDHzui適pH,在經(jīng)過延遲時(shí)間60S后,才能消除內(nèi)源性丙酮酸的干擾。2、再如Tfinder反應(yīng)中抗Vc干擾問題:由...
查看更多
2012-810
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、淀粉酶等檢測(cè)試劑會(huì)因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng),在放置過程中其試劑空白吸光度會(huì)因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上,吸光度上升的反應(yīng),其試劑空白吸光...
查看更多
2012-89
1、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.0)取三羥甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,攪拌溶解,并稀釋至1000ml,用6mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.0,即得。2、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.1)取氯化鈣0.294g,加0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.1,加水稀釋至100ml,即得。3、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH9.0)取三羥甲基氨基甲烷6.06g,加鹽酸賴氨酸3.65g、氯化鈉5.8g、乙二胺四醋酸二鈉...
查看更多
2012-88
1、直接2、間接法3、未標(biāo)記抗體法抗體和酶、熒光素結(jié)合后,或多或少的降低了抗體與抗原的結(jié)合能力。有酶橋法和PAP法,但前者弊端較多。PAP法(PeroxidaseAntiperoxidase.PAP)PAP復(fù)合物(二分子抗體,三分子酶),體積小,穩(wěn)定,穿透性好特點(diǎn):較間接法敏感20~100倍,較前幾種方法非特異性染色輕。4、ABC法(Avidin-Biotin-ComplexMethod)Avidin——卵白素,有四個(gè)亞單位,每個(gè)亞單位有138個(gè)氨基酸,分子兩68kD。一個(gè)卵...
查看更多
2012-86
一、阻止血液過快凝固血液暴露在空氣中會(huì)凝固,當(dāng)將血液滴入試紙采集區(qū)時(shí),由于毛細(xì)效應(yīng),血液會(huì)向試紙的檢測(cè)區(qū)擴(kuò)散,但這需要一點(diǎn)時(shí)間,如果血液凝固過快,可能造成血液未擴(kuò)散到檢測(cè)區(qū),就已經(jīng)凝固,導(dǎo)致檢測(cè)失敗。另一方面,血漿中微凝血塊過多,會(huì)減慢擴(kuò)散的速度,檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的時(shí)間就會(huì)延長(zhǎng)。二、稀釋血液濃度加入稀釋液后,血液的濃度會(huì)降低,HIV抗體的濃度也隨之降低,這就為試紙的靈敏度提出了更高的要求,需要試紙能夠檢測(cè)出低濃度的HIV抗體,也正因此,當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí),那么結(jié)果是非常準(zhǔn)確的。但...
查看更多
2012-83
當(dāng)PCR結(jié)果不甚滿意時(shí),首先檢查以下幾方面并遵照?qǐng)?zhí)行:1、將PCR反應(yīng)的試管與反應(yīng)板緊貼。2、當(dāng)酶反應(yīng)混合物以70℃"熱啟動(dòng)"開始循環(huán)時(shí),切記在加入酶后稍微振蕩一下,因?yàn)樵?.2-ml的PCR管中不能均勻傳熱。3、不要隨意減少dNTP的用量,它是一個(gè)系統(tǒng)的因素,必須與其它成份保持平衡。4、對(duì)于有問題的PCR反應(yīng),例如模板的量少,模板不純和環(huán)狀模板等,先嘗試加Taq酶前的體系進(jìn)行預(yù)變性,后加模板進(jìn)行正常PCR擴(kuò)增。5、沒有擴(kuò)增產(chǎn)物:在提供MgCl2緩沖液中,以0.25mmol/...
查看更多
2012-81
一、分析試驗(yàn)的應(yīng)用類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型,如:可以應(yīng)用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),則會(huì)在抗體說明書上標(biāo)注出來不適于某分析試驗(yàn)。二、樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇zui合適的抗體,至少兩方面因素需要考慮:1、待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域:抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來,抗體...
查看更多
2012-731
一般Abcam抗體的運(yùn)輸過程需要1-2周的時(shí)間,所以是在4℃的條件下來完成的。4℃運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害(如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸。相關(guān)產(chǎn)品信息:凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑
查看更多
掃碼加微信